الاكثار الدقيق للفراولة

سيكون هذا الموضوع عن الاكثار الدقيق للفراولة

وسيشمل النقاط التالية :

مزايا الاكثارالدقيق

التجهيزات الازمة للاكثار الدقيق للفراولة

اجراءات التخلص من الفيروسات والميكوبلازمات

اجراءات التحقق من هوية الاصناف المكثرة

دورة الاكثار الدقيق للفراولة

تخزين نباتات النواة

انتاج شتلات رتبتي السوبر ايليت والاليليت (رتب الاساس)

انتاج الشتلات المسجلة والمعتمدة

وهذا الموضوع بناءا على اختيار من أستاذي الجليل أبوعمر حفظه الله

الاكثار الدقيق للفراولة :


http://www.eria.ee/public/files/05002-evika-aiakult.jpg


http://farm3.static.flickr.com/2368/...246e9c80_m.jpg

http://thumbs.bc.jncdn.com/67203f9c8...063a701_lm.jpg
من التقنيات المستخدمة لانتاج شتلات خالية من الاصابة الفيرسية عن طريق زراعة القمم المرستيمية

وتتضمن مزارع القمم النامية للفراولة ثلاث خطوات كما يلي :

الاولى : انتاج نباتات خالية من الامراض والنيماتودا في المختبر

الثانية : زراعة النباتات الناتجة من الخطوة الاولى تحت ظروف محكمة في بيت محمي

الثالثة : زراعة النباتات الناتجة من الخطوة الثانية في مشتل حقلي امدة موسم واحد فقط

مزايا الاكثار الدقيق :

من اهم مميزات الاكثار الدقيق للفراولة مايلي :

1- الاكثار السريع للتراكيب الوراثية الجديدة او النادرة والمرغوب بها والاصناف الدائمة الحمل في اي وقت من السنة وخلال فترة قصيره وفي مساحة محدودة

2- انتاج نباتات خالية من مختلف الاصابات المرضية بما فيها الفيرسية والحشرية والنيماتودية

3-تكون النباتات الناتجة من مزارع القمم النامية اقوى نموا وذات قدرة عاليه على انتاج المدادات واكثر انتاجية عن تلك التي تنتج بالطريقة العادية وينطبق ذلك على اول وثاني اكثار لتلك الامهات التي تنتج من زراعات الانسجة شريطة ان تكون قد اعيدت زراعتها (نقلها ) في مزارع الانسجة اكثر من 10 -12 مرة وتكون ظاهرة تفوق النباتات النتاجة من مزارع الانسجة في النمو وانتاج المدادات اكثر وضوحا في الاصناف المحايدة للفترة الضوئية عنها في الاصناف القصيرة النهار

4- امكانية حفظ الجيرمبلازم المتوفر من الفراولة في حيز ضيق

التجهيزات الازمة للاكثار الدقيق للفراولة :

يلزم لجل الاكثار الدقيق للفراولة توفر مايلي :

1- مختبر بسيط مزود بأجهزة عادية وزجاجيات لتحضير البيئات والتعقيم وتداول وفحص النباتات

2- حجرة نقل Transfer room مزودة بالـLaminar flow cabinets ومتصلة بالمختبر

http://www.agrsci.unibo.it/dicabo/foto_sito/lab1_s.jpg

3- حجرة نمو growth room مزودة باجهزة التكييف والاضاءة الفلورسنتية ومتصلة بالمختبر

http://www.micropropagation.co.uk/im...rowth_room.jpg

4- صوبة مزودة بفتحات تهوية مغطاة بشبك دقيق لمنع دخول الحشرات وبالمناضد والرذاذ والاضاءة التنجستين من اعلى ونظام تبريد بطريقة المراوح والوسائد

5- حجرة حرارية Heat chamber

6- حجرة تخزين مبردة

7- حجرتا نمو مزودة بوسائل تحكم في درجة الحرارة وشدة الاضاءة بدقة

إجراءات التخلص من الفيروسات والميكوبلازمات


ان مصادر نباتا الامهات التي تستعمل في انتاج شتلات الفراولة في المشاتل الحقلية يجب ان تكون ناتجة من الاكثار الدقيق لقمم مرستيمية سبق تعريضها لحرارة 35-37 م لمدة 6 أسابيع لتثبيط تكاثر الفيروسات فيها ويعد الاكثار باستعمال القمم الخضية المرستيمية (القمة المرستيمية وحدها او مه عدد قليل من مبادئ الاوراق ) هو الوسيلة لضمان الثبات الوراثي للنسل ولتوفير اعداد كبيرة من نباتات الامهات الخالية من الفيرس خلال فترة وجيزة


تصاب الفراولة بأكثر من 54 فيرسا وثماني ميكوبلازمات ويكون الهدف من المعاملة الحرارية مع زراعة القمم المرستيمية فقط التخلص من اي اصابة محتملة بأي من هذه الفيروسات والميكوبلازمات التي يمكن ان تقلل المحصول بنسبة تصل الى 80% وتقلل انتاج المدادات بدرجة كبيرة كذلك وتسمح كذلك المعاملة الحرارية بنمو القمة المرستيمية قبل زراعتها بسرعة تزيد عن سرعة وصول الفيرس اليها ويتم اخضاع النباتات الناتجة من مزارع القمة المرستيمية لاختبارات الاليزا او اختبار DNA probe للتاكد من خلوها من فيروسات معينة


ويتم التحقق من هوية اصناف الفراولة باختبارات البصمة الوراثية واكثرها شيوعاحاليا اختبار التفريد الكهربي .



دورة الاكثار الدقيق للفراولة :


أولا: اختيار النباتات التي يراد اكثارها ومعاملتها حراريا....


تبدأ عملية الاكثار الدقيق للفراولة باختيار النباتات التي يراد اكثارها وزراعتاه في اصص ومعاملتها حراريا (36م لمدة 6 أسابيع ) ثم وضعها في الصوبة وتوفير الظروف المناسبة لها كي تنتج مدادات بوفرة لأن القمم النامية لتلك المدادات هي التي يتم زراعتها



ثانيا : مرحلة فصل القمة الميرستيمية وزراعتها في البيئة الصناعية


تبدأ عملية الاكثار الدقيق سنويا بغمس قمم المدادات التي يراد استعمالها في الاكثار في محلول هيبوكلورايت الصوديوم بتركيز 0.9 % لمدة 10 دقائق ثم غسلها ثلاث مرات بالماء المعقم قبل قطع القمة النامية المرستيمية مباشرة ويجب اختيار القمة النامية الحديثة التكوين وقطعها بطول 0.1-0.5 مم علما بان فرصة نجاح زراعة القمة النامية تقل كلما صغر المرستيم القمي المقطوع الى ان تنعدم تماما عندما يبلغ طوله 0.1 مم كما نا القمم النامية التي يزيد طولها عن 0.7 مم قد لاتكون خالية من الفيرس ويوضع المرستيم المفصول تحت ظروف معقمة في انابيب اختبار تحتوي على 10 مل من بيئة اجار مغذية سبق تعقيمها في الاتوكليف لمدة 15 دقيقة تحت ضغط كيلو جرام واحد على السنتيمتر المربع .


((البيئات المستخدمة في الاكثار الدقيق للفراولة ))


1-البيئة المستخدمة لزراعة المرستيم

http://i578.photobucket.com/albums/s...o/Untitled.jpg

وتستعمل هذه البيئة في مزارعالقمم المرستيمية meristem tip culture وهي عبارة عن محلول نوب Knop solution مزود بالعناصر الدقيقة والمكونات العضوية لبيئة موراشيج وسكوج MS ومع استعمال اندول حمض البيوتريك IBA بدلا من اندول حمض الخليك IAA والسيتوكينين BAP بدلا من الكينيتين وذلك بهدف تحفيز الخلايا على الانقسام حيث تعطي الفراولة في وجوده عددا من البراعم الابطية التي يمنو كل منها الى فرع يعطي براعم ابطية اخرى وهكذا واستخدم الجلوكوز بدلا من السكروز.



توضع المزارع في حجرة النمو على حرارة 25 م واضاءة لمدة 16 ساعة يوميا مع توفير الاضاءة من لمبات فلورسنتية بقوة 2000-2500 لوكس Lux عند مستوى الجزء النباتي المزروع


وعادة ماتبلغ نسبة تلوث المزارع في هذه المرحلة في الظروف الجيدة حوالي 20% وبعد نحو اربعة اسابيع من البقاء في حجرة النمو تكون المرؤستيمات قد نمت بالقدر الكافي لنقلها الى بيئة الاكثار .

مرحلة الاكثار Proliferation او التكاثر Multiplication

وتستعمل فيها البيئة التالية :

http://i578.photobucket.com/albums/ss227/tecobeco/2.jpg



وفي هذهالبيئة يبدأ التكاثر السريع وتتكون كتل او تجمعات من السيقان ففي خلال 12-15 يوما من النقل الى بيئة الاكثار تتكون البراعم الجانبية على النموات النامية من المرستيم والتي تعطي بدورها نموات صغيره يحتوي كل منها على 2-3 وريقات صغيره تنقل تلك الكتل منفردة الى بيئة جديدة كل 4-5 اسابيع ولكن لايجرى سوى 3-4 نفقلات متتالية خلال فترة التكاثر لتقليل احتمالات ظهور الطفرات اثناء لتكاثر الا ان بعض المختبرات تجري من 5-10 نقلات متتالية وفي كل عمليةنقل يتم فصل الكتل الكبيرة الى نبيتات explants مفردة او الى تكتلات صغيره يحتوى كل منها على 3-5 نبيتات صغيرة وتجرى عملية النقل في كبائن معقمة وتختلف اصناف الفراولة في سرعة تضاعف اعداد نباتاتها كل 4 اسابيع بين 4 و 7 اضعاف كل 4 أسابيع
وتنتج نباتات الفراولة التي يحصل عليها بعدد كبير من دورات الاكثار في مزارع الانسجة عددا كبيرا من الازهار مقارنة بالنباتات المنتجة بالطريقة التقليدية .

مرحلة التجذير ...

تستعمل فيها البيئة :

http://i578.photobucket.com/albums/ss227/tecobeco/3.jpg

وتوضع المزارع المنقولة الى بيئة التجذير في اضاءة جيدة لمدة 12 ساعة يوميا وفي خلال 5-6 اسابيع يكون النمو الجذري قد اصبح كافيا لشتل النباتا في بيئات خاصة في الصوب
ويتعين التخلص من اي طفرات يتم التعرف عليها وتتبع اصولها قدر الامكان .

مرحلة الاقلمةAcclamation....

تنقل النباتات من بيئة التجذير الى اصص بقطر 12 سم او شتالات بعيون كبيرة تحتوي على بيئة زراعة يكون اساسها البي موس وتوضع على بنشات تحت الري الرذاذي وفي حرارة 20-22 م ويكفي تشغيل الرذاذ مرة او مرتين يوميا لمدة 7-10 ايام وتحت هذه الظروف لاتزيد نسبة النباتات التي تفشل عن 3-5% وتروى النباتات بعد ذلك بالطريقة العادية ويستغرق ذلك عادة حوالي 4 اسابيع في البيت المحمي وبهاية هذه الفترة تكون نباتات النواة قد اكملت نموها.

تخزين نباتات النواة ....
قد يتطلب الامر احيانا تخزين نباتات النواة وهي باعمار مختلفة ويكون ذلك في حرارة 3 ±0.5 م او صفر ±2م كما يمكن تخزين نباتات النواة قبل اقلمتها وذلك بغسيل البئية من جذورها ثم حفظها في اكياس بلاستيكية على حرارة 3±0.5م لمدة تصل الى 6 اشهر .

انتاج شتلات رتبتي السوبر ايليت والايليت (رتب الاساس )


بعد حوالى 28-30 يومامن بداية اقلمة النباتات النواة في البيوت المحمية فغنها تبدا في انتاج المدادات ويكون مجموعها الجذري قد نما بشكل جيد تشتل هذه النباتات في تربة معقمة في بيت محمي منيع ضد الحشرات حيث تنمو بقوة وتنتج مدادات بوفرة ويمكن ان يعطي النبات الواحد اكثرمن 150 نبات بنهاية الموسم وتلك هي دورة الاكثار الاولى لتقاوي النواة وينتج عناه تقاوي رتبة الاساس او السوبر ايليت

وتستخدم رتبة السوبر ايليت في دورة اخرى من الاكثار تكون كذلك في تربة معقمة في بيت محمي منيع ضد الحشرات وينتج عنها كذلك شتلات الايليت وهي من شتلات الاساس



انتاج الشتلات المسجلة والمعتمدة.....

تستخدم الشتلات المسجلة والمعتمدة في الانتاج التجاري لمحصول الفراولة وهي تنتج في مشاتل تجارية حقلية معتمدة ويستخدم في انتاجها شتلات من رتبتي الايليت والمسجلة حيث تعطي الاولى شتلات من رتبة المسجلة بينما تعطي الثانية شتلات من رتبة المعتمدة


تنتج مشاتل الفراولة ففي مصر كل من الشتلات الطازجه والمجمدة دونما تمييز بين طريقة انتاج كل منهما